ულტრა ნუკლეაზა GMP-კლასის
კატის ნომერი: HC2016A
UltraNuclease GMP-ის ხარისხი გამოხატულია და გაწმენდილია Escherichia coli-ში (E.coli) გენეტიკურად ინჟინერიით და მომზადებული GMP გარემოში.მას შეუძლია შეამციროს უჯრედის სუპერნატანტის და უჯრედის ლიზატის სიბლანტე სამეცნიერო კვლევებში, გაზარდოს ცილების გაწმენდის ეფექტურობა და გააძლიეროს ცილის ფუნქციური კვლევა.პროდუქტს შეუძლია ასევე შეამციროს მასპინძელი ნუკლეინის მჟავის ნარჩენები pg-მდე, აუმჯობესებს აპლიკაციების ბიოლოგიური პროდუქტების მუშაობას და უსაფრთხოებას, მათ შორის ვირუსის გაწმენდას, ვაქცინის წარმოებას და ცილოვან/პოლისაქარიდის ფარმაცევტულ წარმოებას.გარდა ამისა, პროდუქტის გამოყენება შესაძლებელია აგრეთვე ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედების (PBMC) დაგროვების თავიდან ასაცილებლად უჯრედულ თერაპიასა და ვაქცინის შემუშავებაში.
UltraNuclease მოწოდებულია სტერილიზებული რეაგენტის სახით, გამორეცხილი ბუფერში (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% გლიცერინი), უფერო, გამჭვირვალე სითხის გარეგნობით.ეს პროდუქტი დამზადებულია GMP პროცესის მოთხოვნებით და მოწოდებულია თხევადი ფორმით.
კომპონენტები
UltraNuclease GMP ხარისხის (250 U/μL)
შენახვის პირობები
პროდუქტი იგზავნება მშრალი ყინულით და შეიძლება ინახებოდეს -25℃~-15°C ტემპერატურაზე ორი წლის განმავლობაში.
თუ პროდუქტი გახსნილია და ინახება 4℃ ტემპერატურაზე ერთ კვირაზე მეტი ხნის განმავლობაში, გირჩევთ გაფილტროთპროდუქტი მიკრობული დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად.
სპეციფიკაციები
| გამოხატვის მასპინძელი | რეკომბინანტული E. coli UltraNuclease გენით |
| Მოლეკულური წონა | 26,5 კდა |
| ელექტრო წერტილი | 6.85 |
| სიწმინდე | ≥99% (SDS-PAGE) |
| შენახვის ბუფერი | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% გლიცერინი |
|
ერთეულის განმარტება | ერთი აქტივობის ერთეულის (U) განმარტება არის ფერმენტის რაოდენობა, რომელიც გამოიყენებაშეცვალეთ ΔA260-ის შთანთქმის მნიშვნელობა 1.0-ით 30 წუთში 2.625 მლ-შირეაქციის სისტემა 37℃ pH 8.0 (ექვივალენტური სრული მონელების37 მკგ ორაგულის სპერმის დნმ ოლიგონუკლეოტიდებად). |
ინსტრუქციები
1. ნიმუში კოლექცია
მიმაგრებული უჯრედები: ამოიღეთ საშუალება, გარეცხეთ უჯრედები PBS-ით და ამოიღეთ სუპერნატანტი.
სუსპენზიის უჯრედები: შეაგროვეთ უჯრედები ცენტრიფუგირებით, გარეცხეთ უჯრედები PBS-ით, ცენტრიფუგა 6000-ზეrpm 10 წუთის განმავლობაში, შეაგროვეთ გრანულები.
Escherichia coli: შეაგროვეთ ბაქტერიები ცენტრიფუგაციით, ერთხელ დაიბანეთ PBS-ით, ცენტრიფუგა 8000-ზე.rpm 5 წუთის განმავლობაში და შეაგროვეთ გრანულები.
2. ნიმუშის მკურნალობა
შეგროვებული უჯრედის მარცვლების დამუშავება ლიზისის ბუფერით მასის (გ) მოცულობის (მლ) 1: (10-20) თანაფარდობით, ან მექანიკური ან ქიმიური მეთოდებით ყინულზე ან ოთახის ტემპერატურაზე (უჯრედის მარცვლების 1 გ შეიცავს დაახლოებით
109 უჯრედი).
3. ფერმენტებით მკურნალობა
რეაქციის სისტემას დაამატეთ 1-5 მმ MgCl და დააყენეთ pH 8-9-მდე.
დაამატეთ UltraNuclease 250 ერთეულის თანაფარდობის მიხედვით 1 გ უჯრედის მარცვლების მოსანელებლად, ინკუბაცია 37℃ 30 წუთზე მეტი ხნის განმავლობაში.გთხოვთ, იხილოთ „რეკომენდებული რეაქციის დრო“ ფორმას ასარჩევადმკურნალობის ხანგრძლივობა.
4. სუპერნატანტი კოლექცია
გააკეთეთ ცენტრიფუგა 12000 rpm-ზე 30 წუთის განმავლობაში და შეაგროვეთ სუპერნატანტი.
შენიშვნა: თუ ხსნარი არის მჟავე ან ტუტე, ან შეიცავს მარილების, სარეცხი საშუალებების ან მაღალი კონცენტრაციისდენატურანტები, გთხოვთ გაზარდოთ ფერმენტის დოზა ან გააგრძელოთ მკურნალობის დრო შესაბამისად.
რეკომენდირებული რეაქციის პირობებიზე
| Პარამეტრი | ოპტიმალური მდგომარეობა | ეფექტური კონდიციონერი |
| Mg² + კონცენტრაცია | 1-5 მმ | 1-10 მმ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| ტემპერატურა | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT კონცენტრაცია | 0-100 მმ | >0 მმ |
| მერკაპტოეთანოლის კონცენტრაცია | 0-100 მმ | >0 მმ |
| მონოვალენტური კატიონის კონცენტრაცია | 0-20 მმ | 0-150 მმ |
| ფოსფატის კონცენტრაცია | 0-10 მმ | 0-100 მმ |
რეკომენდირებულია რეაქცია დრო (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| ულტრანუკლეაზას რაოდენობა (საბოლოო კონცენტრაცია) | Რეაქციის დრო |
| 0.25 ე/მლ | > 10 სთ |
| 2.5 ე/მლ | > 4 სთ |
| 25 ე/მლ | 30 წთ |
შენიშვნები:
გთხოვთ, ატაროთ საჭირო PPE, ასეთი ლაბორატორიული ქურთუკი და ხელთათმანები თქვენი ჯანმრთელობისა და უსაფრთხოების უზრუნველსაყოფად!
