2×HiF Taq პლუს Master Mix
კატის ნომერი: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (საღებავთან ერთად) არის მზა გამოსაყენებელი 2× წინასწარ შერეული ხსნარი, რომელიც შეიცავს Plus HIF დნმ პოლიმერაზას, dNTP-ებს და ოპტიმიზებულ ბუფერს.ორი მონოკლონური ანტისხეული ოთახის ტემპერატურაზე, რომლებიც თრგუნავს პოლიმერაზას აქტივობას და 3'→5'ეგზონუკლეაზას აქტივობას, ემატება მთავარ მიქსს ადვილად და მაღალი სპეციფიკური Hot Start PCR-ისთვის.გაფართოების ფაქტორი ემატება მთავარ მიქსს, რათა ფერმენტს მისცეს გრძელი ფრაგმენტის გამაძლიერებელი უნარი, გაძლიერების სიგრძე შეიძლება იყოს 13 კბ-მდე, ფერმენტს აქვს 5'→3' დნმ პოლიმერაზას აქტივობა და 3'→5'. ეგზონუკლეაზას აქტივობა, მისი ერთგულება 83-ჯერ აღემატება Taq დნმ პოლიმერაზას, რაც 9-ჯერ აღემატება ჩვეულებრივ დნმ პოლიმერაზას.იგი შესაფერისია რთული შაბლონების გაძლიერებისთვის, გამაძლიერებელი პროდუქტი ბლაგვი ბოლოა.
2×HIF Taq plus Master Mix (საღებავთან ერთად) აქვს უპირატესობები: სწრაფი და მარტივი, მაღალი მგრძნობელობა, ძლიერი სპეციფიკა, კარგი სტაბილურობა და ა.შ. ნაბიჯის პროტოკოლი, ექსპერიმენტული ნაბიჯების გამარტივება და დროის დაზოგვა.ეს პროდუქტი შეიცავს ელექტროფორეზის ინდიკატორ საღებავებს და PCR პროდუქტების გამოყენება შესაძლებელია უშუალოდ ელექტროფორეზისთვის.გარდა ამისა, პროდუქტი ასევე შეიცავს სპეციფიკურ დამცავ აგენტს, რათა მასტერმა მიქსმა შეძლოს სტაბილური აქტივობის შენარჩუნება განმეორებითი გაყინვა-დათბობის შემდეგ.
შენახვის პირობები
პროდუქტები უნდა ინახებოდეს -25~-15℃ ტემპერატურაზე 1 წლის განმავლობაში.
სპეციფიკაციები
| პროდუქტის სპეციფიკაცია | მასტერ მიქსი |
| კონცენტრაცია | 2× |
| ცხელი დაწყება | ჩაშენებული ცხელი დაწყება |
| გადახურვა | ბლანტი |
| რეაქციის სიჩქარე | სწრაფი |
| ზომა (საბოლოო პროდუქტი) | 13 კბ-მდე |
| ტრანსპორტირების პირობები | მშრალი ყინული |
| Პროდუქტის ტიპი | მაღალი ერთგულების PCR პრემიქსები |
ინსტრუქციები
1.PCR რეაქციის სისტემა
| კომპონენტები | მოცულობა (μL) |
| დნმ-ის შაბლონი | ვარგისი |
| წინა პრაიმერი (10 μmol/L) | 2.5 |
| რევერსი პრაიმერი (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq პლუს Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50-მდე |
2.რეკომენდებულია სხვადასხვა შაბლონების გამოყენება
| შაბლონის ტიპი | ფრაგმენტების გაძლიერება 1კბ-დან 10 კბ-მდე |
| გენომის დნმ | 50ნგ-200ნგ |
| პლაზმიდური ან ვირუსული დნმ | 10პგ-20ნგ |
| cDNA | 1-2,5 μL (არ აღემატებოდეს საბოლოო PCR რეაქციის მოცულობის 10%-ს) |
3.გაძლიერების პროტოკოლი
1) ორსაფეხურიანი პროტოკოლი (სირთულის შაბლონი)
| ციკლის ნაბიჯი | Ტემპი. | დრო | ციკლები |
| საწყისი დენატურაცია | 98℃ | 3 წთ | 1 |
| დენატურაცია | 98℃ | 10 წამი | 30-35 |
| გაფართოება | 68℃ | 30 წმ/კბ | |
| საბოლოო გაფართოება | 72℃ | 5 წუთი | 1 |
2) სამსაფეხურიანი პროტოკოლი (ჩვეულებრივი პროტოკოლი)
| ციკლის ნაბიჯი | Ტემპი. | დრო | ციკლები |
| საწყისი დენატურაცია | 98℃ | 3 წთ | 1 |
| დენატურაცია | 98℃ | 10 წამი | 30-35 |
| ანეილირება | 60℃ | 20 წმ | |
| გაფართოება | 72℃ | 30 წმ/კბ | |
| საბოლოო გაფართოება | 72℃ | 5 წუთი | 1 |
3) ანეილირების გრადიენტის პროტოკოლი (სირთულის შაბლონი)
| ციკლის ნაბიჯი | ტემპერატურა | დრო | ციკლები |
| საწყისი დენატურაცია | 98℃ | 3 წთ | 1 |
| დენატურაცია | 98℃ | 10 წმ | 15 (1℃ შემცირება ციკლზე) |
| გრადიენტური ანილირება | 70-55℃ | 20 წმ | |
| გაფართოება | 72℃ | 30 წმ/კბ | |
| დენატურაცია | 98℃ | 10 წმ |
20 |
| ანეილირება | 55℃ | 20 წმ | |
| გაფართოება | 72℃ | 30 წმ/კბ | |
| საბოლოო გაფართოება | 72℃ | 5 წუთი | 1 |
მახასიათებლები სხვადასხვა გამაძლიერებელი პროტოკოლით
| პროტოკოl | ორსაფეხურიანი | სამსაფეხურიანი | გრადიენტური ანილირება |
| სპეც. | სწრაფი | საშუალო | ნელი |
| სპეციფიკა | მაღალი | საშუალო | მაღალი |
| PCR გამოსავალი | საშუალო | მაღალი | საშუალო |
| გამოვლენის მაჩვენებელი | მაღალი | საშუალო | მაღალი |
შენიშვნები
გთხოვთ, ატაროთ საჭირო PPE, ასეთი ლაბორატორიული ქურთუკი და ხელთათმანები თქვენი ჯანმრთელობისა და უსაფრთხოების უზრუნველსაყოფად!
