რნასე ა
რიბონუკლეაზა A(RNaseA) არის ერთჯაჭვიანი პოლიპეპტიდი, რომელიც შეიცავს 4 დისულფიდურ ბმას, მოლეკულური მასით დაახლოებით 13,7 კდალ.RNase არის ენდორიბონუკლეაზა, რომელიც სპეციალურად ანადგურებს ერთჯაჭვიან რნმ-ს C და U ნარჩენებზე.კერძოდ, რღვევა ცნობს ნუკლეოტიდის 5'-რიბოზას მიერ წარმოქმნილ ფოსფოდიესტერულ კავშირს და ფოსფატის ჯგუფს მიმდებარე პირიმიდინის ნუკლეოტიდის 3'-რიბოზაზე, ისე რომ 2,3'-ციკლური ფოსფატები ჰიდროლიზდება შესაბამის3-მდე. ნუკლეოზიდური ფოსფატები (მაგ., pG-pG-pC-pA-pG იშლება RNase A-ით, რათა გამოიმუშაოს pG-pG-pCp და A-PG).RNase A არის ყველაზე აქტიური ერთჯაჭვიანი რნმ-ის დაშლისას.რეკომენდებული სამუშაო კონცენტრაცია არის 1-100 μ გ/მლ, თავსებადი სხვადასხვა რეაქციის სისტემებთან.მარილის დაბალი კონცენტრაცია (0-100 მმ NaCl) შეიძლება გამოყენებულ იქნას რნმ-დნმ-ის ჰიბრიდიზაციით წარმოქმნილი ერთჯაჭვიანი რნმ, ორჯაჭვიანი რნმ და რნმ-ის ჯაჭვების დასაჭრელად.
თუმცა, მარილის მაღალი კონცენტრაციის დროს (≥0.3 M), RNase A მხოლოდ სპეციალურად წყვეტს ერთჯაჭვიან რნმ-ს.
RNase A ყველაზე ხშირად გამოიყენება რნმ-ის მოსაშორებლად პლაზმიდური დნმ-ის ან გენომიური დნმ-ის მომზადების დროს.აქტიურია თუ არა DNase მომზადების პროცესში, შეიძლება ადვილად იმოქმედოს რეაქციაზე.წყლის აბაზანაში დუღილის ტრადიციული მეთოდი შეიძლება გამოყენებულ იქნას DNase აქტივობის ინაქტივაციისთვის.ეს პროდუქტი არ შეიცავს დნაზას და პროტეაზას და არ საჭიროებს თერმულ დამუშავებას გამოყენებამდე.გარდა ამისა, ეს პროდუქტი ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას მოლეკულური ბიოლოგიის ექსპერიმენტებში, როგორიცაა RNase დაცვის ანალიზი და რნმ თანმიმდევრობის ანალიზი.
შენახვის პირობები
პროდუქტი უნდა ინახებოდეს -25℃~-15℃ ტემპერატურაზე 2 წლის განმავლობაში.
სპეციფიკაციები
| გარეგნობა | ფხვნილი |
| რაოდენობა | 100 მგ / 1 გ |
| Პროდუქტის ტიპი | RNase A |
ინსტრუქციები
ეს არის ერთ-ერთი გავრცელებული მეთოდი RNase A შენახვის ხსნარის მოსამზადებლად.მისი მომზადებაც შეიძლებასხვა მეთოდებით ლაბორატორიული ან საცნობარო ლიტერატურის ტრადიციული მეთოდების მიხედვით (როგორიცააპირდაპირ იხსნება 10 მმ Tris-HCl, pH 7.5 ან Tris-NaCl ხსნარში)
1. გამოიყენეთ 10 მმ ნატრიუმის აცეტატი (pH 5.2) 10 მგ/მლ RNase A შესანახი ხსნარის მოსამზადებლად.
2. გათბობა 100 ℃ 15 წთ.
3. გააგრილეთ ოთახის ტემპერატურამდე, დაამატეთ 1/10 მოცულობის 1 M Tris-HCl (pH 7.4), შეცვალეთ მისი pH 7.4-მდე (ამისთვისმაგალითად, დაამატეთ 500 მლ 10 მგ/მლ RNase შესანახი ხსნარი 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. ქვედაფასოება -20℃-ზე გაყინული შენახვისთვის, რომელიც შეიძლება იყოს სტაბილური 2 წლამდე.
[შენიშვნები]:
ნეიტრალურ პირობებში RNaseA ხსნარის დუღილისას წარმოიქმნება RNase ნალექი;ადუღეთ დაბალ pH-ზე და ნალექის არსებობის შემთხვევაში შეინიშნება, რაც შესაძლოა გამოწვეული იყოს ცილოვანი მინარევების არსებობით.თუ ნალექი აღმოჩენილია ადუღების შემდეგ, მინარევები შეიძლება მოიხსნას მაღალი სიჩქარით ცენტრიფუგირებით (13000 rpm) და შემდეგ შეფუთვა ყინვაში შესანახად.
შენიშვნები
გთხოვთ, ატაროთ საჭირო PPE, ასეთი ლაბორატორიული ქურთუკი და ხელთათმანები, თქვენი ჯანმრთელობისა და უსაფრთხოების უზრუნველსაყოფად.
