ერთი ნაბიჯის სწრაფი RT-qPCR ზონდი Premix-UNG
კატის ნომერი: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) არის ზონდზე დაფუძნებული RT-qPCR სწრაფი გამოვლენის ნაკრები, რომელიც შესაფერისია ერთჯერადი ან მულტიპლექსური რაოდენობრივი PCR-ისთვის რნმ-ის შაბლონად გამოყენებით (როგორიცაა რნმ ვირუსი).ეს პროდუქტი იყენებს ახალი თაობის ანტისხეულებით მოდიფიცირებულ Taq დნმ პოლიმერაზას და ერთსაფეხურიან გამოყოფილ უკუ ტრანსკრიპტაზას, ოპტიმიზებული ბუფერით სწრაფი გაძლიერებისთვის, რომელსაც აქვს გაძლიერების უფრო სწრაფი სიჩქარე, გაძლიერების უფრო მაღალი ეფექტურობა და სპეციფიკა.იგი მხარს უჭერს დაბალანსებულ გაძლიერებას როგორც ერთ-პლექს, ასევე მულტიპლექსში დაბალი და მაღალი კონცენტრაციის ნიმუშებში მოკლე დროში.
კომპონენტები
1. 5×RT-qPCR ბუფერი (U+)
2. ფერმენტის ნარევი (U+)
შენიშვნები:
ა.5×RT-qPCR ბუფერი (U+) მოიცავს dNTP და Mg2+;
ბ.ფერმენტის ნაზავი (U+) მოიცავს საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას, Hot Start Taq დნმ პოლიმერაზას, RNase ინჰიბიტორს და UDG-ს;
გ.გამოიყენეთ RNase-ის გარეშე რჩევები, EP მილები და ა.შ.
გამოყენებამდე კარგად აურიეთ 5×RT-qPCR ბუფერი (U+).თუ დათბობის შემდეგ ნალექი იქნება, დაელოდეთ ბუფერის ოთახის ტემპერატურაზე დაბრუნებას, შეურიეთ და დაითხოვეთ და შემდეგ გამოიყენეთ ისინი ჩვეულებრივ.
შენახვის პირობები
პროდუქტი იგზავნება მშრალი ყინულით და შეიძლება ინახებოდეს -25~-15℃ ტემპერატურაზე 1 წლის განმავლობაში.
ინსტრუქციები
1. რეაქცია სისტემა
| კომპონენტები | მოცულობა (20 μL რეაქცია) |
| 2 ×RT-qPCR ბუფერი | 4მკლ |
| ფერმენტების ნარევი (U+) | 0.8 მლ |
| პრაიმერი წინ | 0.1~ 1.0μM |
| პრაიმერი რევერსი | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0,05~0,25μM |
| შაბლონი | X μL |
| RNase-ის გარეშე წყალი | 25 მლ-მდე |
შენიშვნები: რეაქციის მოცულობაა 10-50μL.
2. ველოსიპედის პროტოკოლი (Sტანდარტი)
| ციკლი ნაბიჯი | Ტემპი. | დრო | ციკლები |
| საპირისპირო ტრანსკრიფცია | 55 ℃ | 10 წთ | 1 |
| საწყისი დენატურაცია | 95 ℃ | 30 წმ | 1 |
| დენატურაცია | 95 ℃ | 10 წმ | 45 |
| ანეილირება/გაფართოება | 60 ℃ | 30 წმ |
| ველოსიპედის პროტოკოლი (Სწრაფი) ციკლი ნაბიჯი |
Ტემპი. |
დრო |
ციკლები |
| საპირისპირო ტრანსკრიფცია | 55 ℃ | 5 წუთი | 1 |
| საწყისი დენატურაცია | 95 ℃ | 5 წმ | 1 |
| დენატურაცია | 95 ℃ | 3 წმ | 43 |
| ანეილირება/გაფართოება | 60 ℃ | 10 წმ |
შენიშვნები:
ა.საპირისპირო ტრანსკრიფციის ტემპერატურა 50℃-დან 60℃-მდეა, ტემპერატურის გაზრდა ხელს უწყობს რთული სტრუქტურებისა და მაღალი CG შემცველობის შაბლონების გაძლიერებას;
ბ.დამუშავების ოპტიმალური ტემპერატურა უნდა დარეგულირდეს პრაიმერის Tm მნიშვნელობის მიხედვით და შეარჩიოს უმოკლეს დრო ფლუორესცენტური სიგნალის შეგროვებისთვის რეალურ დროში PCR ინსტრუმენტის საფუძველზე.
შენიშვნები
გთხოვთ, ატაროთ საჭირო PPE, ასეთი ლაბორატორიული ქურთუკი და ხელთათმანები თქვენი ჯანმრთელობისა და უსაფრთხოების უზრუნველსაყოფად!
