BsaI შეზღუდვის ენდონუკლეაზა
აღწერა
BsaI შეზღუდვის ფერმენტი არის II ტიპის შეზღუდვის ენდონუკლეაზა, მიღებული რეკომბინანტული ცილისგან, რომელიც კოდირებულია BspQI გენით Bacillus sphaericus-ში, გამოხატული E.coli-ით.შეზღუდვის ენდონუკლეაზები ფართოდ გამოიყენება გენის რუკების, კლონირებისა და სხვა სფეროებში.ეს ფერმენტი სწრაფად ჭრის დნმ-ს გენის ეფექტური ხაზინარიზაციისთვის.რომლებსაც აქვთ იგივე სპეციფიკა, რაც მშობლიურ ფერმენტებს და შემცირებული ვარსკვლავური აქტივობა.მისი ამოცნობის თანმიმდევრობა და გაყოფის ადგილები შემდეგია:
5'·······GGTCTC(N)·········3'
3'·······CCAGAG(NNNNN)········5'
ქიმიური სტრუქტურა
Პროდუქტის მახასიათებლები
• რესტრიქციულ ენდონუკლეაზას აქვს მაღალი ფერმენტული აქტივობა და სწრაფად ასრულებს მონელების რეაქციას.
• დაბალი არასპეციფიკური ენდონუკლეაზური აქტივობა ზუსტი „სკალპელის“ ჭრის უზრუნველსაყოფად.
• არ არის BSA სისტემა, რომელიც ამცირებს სითბოს წყაროს დაბინძურებას.
სპეციფიკაცია
სატესტო ნივთები | სპეციფიკაციები |
ფერმენტის აქტივობა | 20 ე/მკლ |
სისუფთავე (SDS-PAGE) | ≥95% |
რნასე | არცერთი არ არის აღმოჩენილი |
არასპეციფიკური DNase აქტივობა | არ არის გამოვლენილი |
ვარსკვლავის აქტივობა | არ არის გამოვლენილი |
ლიგირება და რეკუტირება | მონელების შემდეგ შესაძლებელია დნმ-ის ფრაგმენტების ლიგატირება.და ამ ლიგირებული ფრაგმენტების გადაჭრა შესაძლებელია ბსალთან. |
ენდოტოქსინები (LAL-ტესტი) | ≤10 ევრო/მგ |
E.Coli დნმ | ≤1 ასლი/2U |
Ხარისხის კონტროლი
სისუფთავე ≥ 95%, არა DNase, RNase აქტივობა, მასპინძლის დნმ-ის ნარჩენი ≤ 100 pg/mg, მასპინძლის ცილის ნარჩენი ≤ -50 ppm, ენდოტოქსინის ნარჩენი ≤ 10EU/მგ, პროტეაზას აქტივობა არ არის, სტერილური, მიკოპლაზმისგან თავისუფალი
განაცხადი
დაიჯესტით პლაზმიდი, რათა მოამზადოს ხაზოვანი დნმ-ის ფრაგმენტი პოლის ბოლოს (A/T/C/G);
პლაზმური შაბლონის ხაზოვანი მოწყობა ინ ვიტრო ტრანსკრიფციამდე;
შეზღუდვა დაიჯესტი;
ერთეულის განმარტება
ერთი ერთეული განისაზღვრება, როგორც ფერმენტის რაოდენობა, რომელიც საჭიროა 1 მკგ შიდა კონტროლის დნმ-ის მოსანელებლად 1 საათში 37°C ტემპერატურაზე, რეაქციის საერთო მოცულობაში 50 μL.
ტრანსპორტირება და შენახვა
ტრანსპორტირება:იგზავნება -15°C-მდე
შენახვა:ინახება -25~-15°C ტემპერატურაზე
რეკომენდირებული ხელახალი ტესტი ცხოვრება:1 წელი