Robustart Taq დნმ პოლიმერაზა

Robustart Taq დნმ პოლიმერაზა არის ცხელი დაწყების დნმ პოლიმერაზა.ამ პროდუქტს შეუძლია არა მხოლოდ უკეთესად დათრგუნოს არასპეციფიკური რეაქცია, რომელიც გამოწვეულია პრაიმერების არასპეციფიკური ანეილით ან პრაიმერის აგრეგაციით PCR სისტემის მომზადებისა და გაძლიერების პროცესში.აქედან გამომდინარე, მას აქვს შესანიშნავი სპეციფიკა და უფრო ეფექტურია დაბალი კონცენტრაციის შაბლონების ამპლიფიკაციისთვის და შესაფერისია მულტიპლექსირებული PCR ამპლიფიკაციის რეაქციისთვის.უფრო მეტიც, ამ პროდუქტს აქვს ძალიან კარგი გამოყენებადობა და სტაბილური ამპლიფიკაციის შედეგების მიღება შესაძლებელია სხვადასხვა ტიპის PCR რეაქციების დროს.

კომპონენტები

1.5 U/μL Robustart Taq დნმ პოლიმერაზა

2.10 × PCR ბუფერი II (Mg²+ უფასო) (სურვილისამებრ)

3.25 მმ MgCl₂(სურვილისამებრ)

* 10 × PCR ბუფერი II (Mg²+ უფასო) არ შეიცავს dNTP და Mg²+, გთხოვთ, დაამატოთ dNTPs და MgCl₂რეაქციის სისტემის მომზადებისას.

რეკომენდებული აპლიკაციები

1.სწრაფი გაძლიერება.

2.მრავალჯერადი გაძლიერება.

3.სისხლის, ნაცხის და სხვა ნიმუშების პირდაპირი გაძლიერება.

4.რესპირატორული დაავადებების გამოვლენა.

შენახვის მდგომარეობა

-20°C ხანგრძლივი შენახვისთვის, გამოყენებამდე კარგად უნდა იყოს შერეული, მოერიდეთ ხშირი გაყინვა-დათბობას.

*თუ ნალექი ხდება გაგრილების შემდეგ, ეს ნორმალურია;შერევამდე და გამოყენებამდე რეკომენდებულია ოთახის ტემპერატურაზე დაბალანსება.

ერთეულის განმარტება

ერთი აქტიური ერთეული (U) განისაზღვრება, როგორც ფერმენტის რაოდენობა, რომელიც აერთიანებს 10 ნმოლ დეზოქსირიბონუკლეოტიდს მჟავაში უხსნად მასალაში 74°C ტემპერატურაზე 30 წუთის განმავლობაში გააქტიურებული ორაგულის სპერმის დნმ შაბლონის/პრაიმერის სახით.

Ხარისხის კონტროლი

1.SDS-PAGE ელექტროფორეზული სისუფთავე 98%-ზე მეტი.

2.გამაძლიერებელი მგრძნობელობა, პარტია-სერიული კონტროლი, სტაბილურობა.

3.არ არის ეგზოგენური ნუკლეაზას აქტივობა, არ არის ეგზოგენური ენდონუკლეაზა ან ეგზონუკლეაზა დაბინძურება

ინსტრუქციები

რეაქციის დაყენება

შენიშვნები:

1) ა.ბუფერი არ შეიცავს dNTP და Mg²+, გთხოვთ, დაამატოთ dNTP და MgCl₂რეაქციის სისტემის მომზადებისას.

2) ბ.თუ გამოიყენება qPCR/qRT-PCR-სთვის, ფლუორესცენტური ზონდები უნდა დაემატოს რეაქციის სისტემას.ჩვეულებრივ, პრაიმერის საბოლოო კონცენტრაცია 0,2 μM მისცემს კარგ შედეგს;თუ რეაქცია ცუდია, პრაიმერის კონცენტრაცია შეიძლება დარეგულირდეს 0,2-1 μM დიაპაზონში.ზონდის კონცენტრაცია ჩვეულებრივ ოპტიმიზებულია 0.1-0.3 μM დიაპაზონში.კონცენტრაციის გრადიენტის ექსპერიმენტები შეიძლება ჩატარდეს პრაიმერისა და ზონდის საუკეთესო კომბინაციის მოსაძებნად.

თერმული ციკლის პროტოკოლი

შენიშვნები

1.სწრაფი დნმ პოლიმერაზას გაძლიერების სიჩქარე არ უნდა იყოს 1 კბ/10 წმ-ზე ნაკლები.ტემპერატურის აწევისა და დაცემის სიჩქარე, ტემპერატურის კონტროლის რეჟიმი და სითბოს გამტარობის ეფექტურობა სხვადასხვა PCR ინსტრუმენტების ძალიან განსხვავდება, ამიტომ რეკომენდებულია რეაქციის ოპტიმალური პირობების ოპტიმიზაცია კონკრეტული სწრაფი PCR ინსტრუმენტისთვის.

2.სისტემა უაღრესად ადაპტირებადია, უფრო მაღალი სპეციფიკურობითა და მგრძნობელობით.

3.ვარგისია მაღალი მგრძნობელობის PCR გამოვლენის რეაგენტებად გამოსაყენებლად და შეიძლება გამოყენებულ იქნას მულტიპლექსური PCR ამპლიფიკაციის რეაქციებში.

4.5'→3' პოლიმერაზას აქტივობა, 5'→3' ეგზონუკლეაზას აქტივობა;არა 3'→5' ეგზონუკლეაზას აქტივობა;არ აქვს კორექტირების ფუნქცია.

5.ვარგისია PCR და RT-PCR ხარისხობრივი და რაოდენობრივი ტესტირებისთვის.

6.PCR პროდუქტის 3' ბოლო არის A, რომელიც შეიძლება პირდაპირ კლონირდეს T ვექტორში.

7.სამსაფეხურიანი მეთოდი რეკომენდირებულია პრაიმერებისთვის დუღილის დაბალი ტემპერატურით ან 200 bp-ზე მეტი ფრაგმენტების გაძლიერებისთვის.