Multiplex One Step RT-qPCR Premix
აღწერა
კატის ნომერი: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix არის მულტიპლექსური რაოდენობრივი PCR ნაკრები, რომელიც დაფუძნებულია შაბლონად რნმ-ზე.ექსპერიმენტში, საპირისპირო ტრანსკრიფცია და რაოდენობრივი PCR ხორციელდება იმავე რეაქციის მილში, რაც ამარტივებს ექსპერიმენტულ ოპერაციას და ამცირებს დაბინძურების რისკს.ბუფერული და ფერმენტული ნარევის უნიკალური დიზაინი შეიძლება გამოყენებულ იქნას ერთსაფეხურიან ლიოფილიზებულ სისტემაში.ნაკრები იყენებს სითბოს მდგრად საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას პირველი ჯაჭვის cDNA-ს ეფექტური სინთეზისთვის, Hotstart Taq დნმ პოლიმერაზას გამოყენებით რაოდენობრივი ამპლიფიკაციისთვის.იგი შეიცავს ოპტიმიზებულ რეაქციის ბუფერს, ფერმენტების ნარევს და ა.შ. და დაემატა ფაქტორები, რომლებიც ეფექტურად აფერხებენ არასპეციფიკურ PCR-ს ამპლიფიკაციას და აძლიერებენ მრავალჯერადი qPCR რეაქციის ამპლიფიკაციის ეფექტურობას, რაც საშუალებას აძლევს მრავალჯერადი ფლუორესცენციის რაოდენობრივ გაძლიერებას, ხოლო უზრუნველყოფს პრაიმერების ამპლიფიკაციის ეფექტურობას.
კომპონენტები
| სახელი |
| 1. ლიო-ბუფერი |
| 2. ლიო-ფერმენტის მიქსი |
| 3. ლიო დამცავი |
ტრანსპორტირების მდგომარეობაიონი
პასუხი: ლიო-ბუფერი და დამცავი საშუალება: -25~-15℃, შენახვის ვადა არის 1 წელი.
B: ლიო-ფერმენტული ნარევი, 2-8 ℃, შენახვის ვადა 6 თვე.
ოპერაციის ინსტრუქცია
1. რეაქციის სისტემა (მაგალითად აიღეთ 25 μL)
| კომპონენტები | მოცულობა (μL) | საბოლოო კონცენტრაცია |
| ლიო-ბუფერი | 6 | 1* |
| ლიო-ფერმენტის მიქსი | 1 | - |
| ლიო-პროტექტანტი | 8 | - |
| პრაიმერის მიქსი (10 მკმ) | 1 | 0.1- 1 მმ |
| ზონდის ნარევი (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5 მმ |
| რნმ შაბლონი | 5 | - |
| DEPC H2O | 25-მდე | - |
2. ოპტიმიზებული ველოსიპედის პროტოკოლი
1) სტანდარტული ველოსიპედის პროტოკოლი
| რეაქციის ეტაპი | ტემპერატურა | დრო | ციკლი | |
| 1 | საპირისპირო ტრანსკრიფცია | 50°Ca | 10 წთ | 1 |
| 2 | საწყისი დენატურაცია | 95°C | 5 წუთი | 1 |
| 3 | გამაძლიერებელი რეაქცია | 95°C | 15 წმ | 45 ციკლი |
| 60°Cb | 30 წმc |
2) სწრაფი ველოსიპედის პროტოკოლი
|
| რეაქციის ეტაპი | ტემპერატურა | დრო | ციკლი |
| 1 | საპირისპირო ტრანსკრიფცია | 50°Ca | 2 წთ | 1 |
| 2 | საწყისი დენატურაცია | 95°C | 2 წმ | 1 |
| 3 | გამაძლიერებელი რეაქცია | 95°C | 1წმ |
45 ციკლი |
| 60°Cb | 13 წმc |
Შენიშვნა:
a) უკუ ტრანსკრიფცია: ტემპერატურა შეიძლება აირჩიოს 42°C ან 50°C 10-15 წუთის განმავლობაში.
b) გამაძლიერებელი რეაქცია: ტემპერატურა რეგულირდება შექმნილი პრაიმერების Tm მნიშვნელობის მიხედვით.
გ)ფლუორესცენცია სიგნალი შეძენა: გთხოვთ დააყენოთ ექსპერიმენტული პროცედურა მოთხოვნების შესაბამისადინსტრუმენტის სახელმძღვანელო.
ტექნიკური ინფორმაცია/ სპეციფიკაციები
| ცხელი დაწყება | ჩაშენებული ცხელი დაწყება |
| გამოვლენის მეთოდი | პრაიმერი-ზონდის გამოვლენა |
| PCR მეთოდი | ერთი ნაბიჯი RT-qPCR |
| ნიმუშის ტიპი | რნმ |
შენიშვნები
1. ეს პროდუქტი განკუთვნილია მხოლოდ კვლევისთვის.
2. გთხოვთ, ატაროთ საჭირო PPE, ასეთი ლაბორატორიული ქურთუკი და ხელთათმანები, თქვენი ჯანმრთელობისა და უსაფრთხოების უზრუნველსაყოფად!
