Bst 2.0 დნმ პოლიმერაზა (გლიცეროლის გარეშე, მაღალი სიმკვრივის)
Bst დნმ პოლიმერაზა V2 მიღებულია Bacillus stearothermophilus დნმ პოლიმერაზა I-დან, რომელსაც აქვს 5'→3' დნმ პოლიმერაზას აქტივობა და ძლიერი ჯაჭვის შემცვლელი აქტივობა, მაგრამ არა 5'→3' ეგზონუკლეაზას აქტივობა.Bst დნმ პოლიმერაზა V2 იდეალურად შესაფერისია ჯაჭვის გადაადგილებისთვის, იზოთერმული გაძლიერებისთვის LAMP (Loop შუამავლობით იზოთერმული გაძლიერება) და სწრაფი თანმიმდევრობისთვის.ამ Bst დნმ პოლიმერაზას V2 შეუძლია დათრგუნოს დნმ პოლიმერაზას აქტივობა ოთახის ტემპერატურაზე, რათა შესაძლებელი იყოს მისი ფუნქციონირება და რეაქციის სისტემის ფორმულირება ოთახის ტემპერატურაზე, თავიდან აიცილოს არასპეციფიკური გაძლიერება და გააუმჯობესოს რეაქციის ეფექტურობა. იყოს ლიოფილიზებული.გარდა ამისა, მას შეუძლია გაათავისუფლოს თავისი აქტივობა ამაღლებულ ტემპერატურაზე, რაც გამორიცხავს აქტივაციის ცალკეული ეტაპის საჭიროებას.
კომპონენტები
| Კომპონენტი | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst დნმ პოლიმერაზა V2 (გლიცეროლის გარეშე) (32 U/μL) | 0,05 მლ | 0,25 მლ | 2,5 მლ |
| 10×HC Bst V2 ბუფერი | 1,5 მლ | 2×1,5 მლ | 3×10 მლ |
| MgSO4 (100 მმ) | 1,5 მლ | 2×1,5 მლ | 2×10 მლ |
აპლიკაციები
1.LAMP იზოთერმული გაძლიერება
2.დნმ-ის ჯაჭვის ერთჯერადი გადაადგილების რეაქცია
3.მაღალი GC გენის თანმიმდევრობა
4.ნანოგრამის დონის დნმ-ის თანმიმდევრობა.
შენახვის მდგომარეობა
ტრანსპორტირება 0°C-ზე და ინახება -25°C~-15°C ტემპერატურაზე.
ერთეულის განმარტება
ერთი ერთეული განისაზღვრება, როგორც ფერმენტის რაოდენობა, რომელიც აერთიანებს 25 ნმოლ dNTP-ს მჟავაში უხსნად მასალაში 30 წუთში 65°C ტემპერატურაზე.
ნათურის რეაქცია
| კომპონენტები | 25 μLსისტემა |
| 10×HC Bst V2 ბუფერი | 2,5 მლ |
| MgSO4 (100 მმ) | 1.5 მლ |
| dNTP (თითოეული 10 მმ) | 3,5 მლ |
| SYTO™ 16 მწვანე (25×)a | 1.0 მლ |
| პრაიმერის ნაზავიb | 6 მლ |
| Bst დნმ პოლიმერაზა V2 (გლიცეროლის გარეშე) (32 ე/მლ) | 0,25 მლ |
| შაბლონი | × μL |
| ddH2O | 25 მლ-მდე |
შენიშვნები:
1) ა.SYTOTM 16 Green (25×): ექსპერიმენტული საჭიროებების მიხედვით, სხვა საღებავების გამოყენება შესაძლებელია შემცვლელად;
2) ბ.პრაიმერის ნარევი: მიღებული 20 μM FIP, 20 μM BIP, 2.5 μM F3, 2.5 μM B3, 5 μM LF, 5 μM LB და სხვა მოცულობების შერევით.
რეაქცია და მდგომარეობა
1 × HC Bst V2 ბუფერი, ინკუბაციური ტემპერატურაა 60°C-დან 65°C-მდე.
სითბოს ინაქტივაცია
80°C, 20 წთ.
