2×PCR სუპერ მიქსი (საღებავთან ერთად)
2× PCR Master Mix შეიცავს Taq დნმ პოლიმერაზას, dNTP-ებს და PCR-ისთვის საჭირო სხვა კომპონენტებს.Master Mix სტაბილურია 3 თვის განმავლობაში 4℃ ტემპერატურაზე ჩვენი მორგებული სტაბილიზატორებით.წინასწარი შერევის ხსნარი ოპტიმიზებულია ჩვეულებრივი PCR-სთვის და მზად არის გამოსაყენებლად დნმ-ის შაბლონისა და პრაიმერების დამატებით.PCR პროდუქტები შეიძლება ჩაიტვირთოს პირდაპირ ელექტროფორეზისთვის წინასწარ დატვირთული ბრომფენოლის ლურჯი საღებავით.გაძლიერებული პროდუქტები შეიცავს 3 '-dA პროტრუზიას და ადვილად შეიძლება კლონირდეს T ვექტორში.2×PCR Master Mix ამარტივებს PCR პროცედურას და ამცირებს დაბინძურებას.
შენახვის პირობები
პროდუქტები უნდა ინახებოდეს -25℃~-15℃ ტემპერატურაზე 2 წლის განმავლობაში.
სპეციფიკაციები
ერთგულება (Taq-ის წინააღმდეგ) | 1× |
ცხელი დაწყება | No |
გადახურვა | 3' - ა |
პოლიმერაზა | Taq დნმ პოლიმერაზა |
რეაქციის ფორმატი | სუპერმიქსი ან მასტერ მიქსი |
რეაქციის სიჩქარე | სტანდარტული |
პროდუქტის ტიპი | PCR Master Mix (2x) |
ინსტრუქციები
1.რეაქციის სისტემა
კომპონენტები | მოცულობა(μL) |
შაბლონი დნმ | ვარგისი |
პრაიმერი 1 (10 მკმოლ/ლ) | 2 |
პრაიმერი 2 (10 μmol/L) | 2 |
2× PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | 50-მდე |
2.გაძლიერების პროტოკოლი
ციკლის ნაბიჯები | ტემპერატურა (°C) | დრო | ციკლები |
საწყისი დენატურაცია | 94 | 5 წუთი | 1 |
დენატურაცია | 94 | 30 წმ | 35 |
ანეილირება | 50-60 | 30 წმ | |
გაფართოება | 72 | 30-60 წმ/კბ | |
საბოლოო გაფართოება | 72 | 10 წთ | 1 |
Შენიშვნა:
1) შაბლონის გამოყენება: 50-200 ნგ გენომის დნმ;0,1-10ნგ პლაზმიდური დნმ.
2) მგ2+კონცენტრაცია: ეს პროდუქტი შეიცავს 3 მმ MgCl2, შესაფერისი PCR რეაქციების უმეტესობისთვის.
3) დამუშავების ტემპერატურა: გთხოვთ, გაეცნოთ პრაიმერების თეორიულ Tm მნიშვნელობას.ანეილირების ტემპერატურა შეიძლება დაყენდეს პრაიმერის თეორიულ მნიშვნელობაზე 2-5℃-ზე დაბლა.
4) გაფართოების დრო: მოლეკულური იდენტიფიკაციისთვის რეკომენდებულია 30 წმ/კბ.გენის კლონირებისთვის რეკომენდებულია 60 წმ/კბ.
შენიშვნები
1.PCR პროდუქტები 2× PCR Master Mix-ით არ არის შესაფერისი პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზისთვის.
2.თქვენი უსაფრთხოებისა და ჯანმრთელობისთვის გთხოვთ ატაროთ ლაბორატორიული ხალათები და ერთჯერადი ხელთათმანები ოპერაციისთვის.
3.იგი გამოიყენება მხოლოდ კვლევისთვის!