2×PCR Master Mix (საღებავების გარეშე)
PCR Master Mix არის ერთგვარი ჩვეულებრივი PCR წინასწარ შერეული ხსნარი, რომელიც მზად არის გამოსაყენებლად, მათ შორის Taq DNA პოლიმერაზა, dNTP mix MgCl2 და ოპტიმიზებული ბუფერი.რეაქციის დროს, მხოლოდ პრაიმერი და შაბლონი შეიძლება დაემატოს გამაძლიერებლად, რაც მნიშვნელოვნად ამარტივებს ექსპერიმენტის მოქმედების ეტაპებს.ეს პროდუქტი შეიცავს შესანიშნავ სტაბილიზატორებს და შეიძლება ინახებოდეს 3 თვის განმავლობაში 4℃ ტემპერატურაზე.PCR პროდუქტს აქვს 3'-dA პროტრუზია და ადვილად შეიძლება კლონირდეს T ვექტორში.
შენახვის პირობები
პროდუქტი უნდა ინახებოდეს -25℃-15℃ ტემპერატურაზე ორი წლის განმავლობაში.
სპეციფიკაციები
| ერთგულება (Taq-ის წინააღმდეგ) | 1× |
| ცხელი დაწყება | No |
| გადახურვა | 3′-A |
| პოლიმერაზა | Taq დნმ პოლიმერაზა |
| რეაქციის ფორმატი | სუპერმიქსი ან მასტერ მიქსი |
| რეაქციის სიჩქარე | სტანდარტული |
| პროდუქტის ტიპი | PCR Master Mix (2×) |
ინსტრუქციები
1.რეაქციის სისტემა
| კომპონენტები | ზომა (μL) |
| შაბლონი დნმ | ვარგისი |
| პრაიმერი 1 (10 მკმოლ/ლ) | 2 |
| პრაიმერი 2 (10 მკმოლ/ლ) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50-მდე |
2.გაძლიერების პროტოკოლი
| ციკლის ნაბიჯები | ტემპერატურა (°C) | დრო | ციკლები |
| წინასწარი დენატურაცია | 94 ℃ | 5 წთ | 1 |
| დენატურაცია | 94 ℃ | 30 წმ | 35 |
| ანეილირება | 50-60 ℃ | 30 წმ | |
| გაფართოება | 72 ℃ | 30-60 წმ/კბ | |
| საბოლოო გაფართოება | 72 ℃ | 10 წთ | 1 |
შენიშვნები:
1) შაბლონის გამოყენება: 50-200 ნგ გენომის დნმ;0.1- 10 ნგ პლაზმიდური დნმ.
2) მგ2+კონცენტრაცია: ეს პროდუქტი შეიცავს 3 მმ MgCl2-ს, რომელიც შესაფერისია PCR რეაქციების უმეტესობისთვის.
3) დამუშავების ტემპერატურა: გთხოვთ, გაეცნოთ პრაიმერების თეორიულ Tm მნიშვნელობას.ანეილირების ტემპერატურა შეიძლება დაყენდეს 2-5 ℃ პრაიმერის თეორიულ მნიშვნელობაზე დაბალი.
4) გაფართოების დრო: მოლეკულური იდენტიფიკაციისთვის რეკომენდებულია 30 წმ/კბ.გენის კლონირებისთვის, 60რეკომენდირებულია წამ/კბ.
შენიშვნები
1.თქვენი უსაფრთხოებისა და ჯანმრთელობისთვის გთხოვთ ატაროთ ლაბორატორიული ხალათები და ერთჯერადი ხელთათმანები ოპერაციისთვის.
2.მხოლოდ კვლევისთვის!
