ტუტე ფოსფატაზა (ALP)
აღწერა
ტუტე ფოსფატაზა მიღებულია რეკომბინანტული E. coli შტამიდან, რომელიც ატარებს TAB5 გენს.ფერმენტი კატალიზებს დნმ-ისა და რნმ-ის ფოსფომონესტერების 5' და 3' ბოლოების დეფოსფორილირებას.ასევე, ის ჰიდროლიზებს რიბოზას, ისევე როგორც დეზოქსირიბონუკლეოზიდის ტრიფოსფატებს (NTPs და dNTPs).TAB5 ტუტე ფოსფატაზა მოქმედებს 5' ამობურცულ, 5' ჩაღრმავებულ და ბლაგვი ბოლოებზე.ფოსფატაზა შეიძლება გამოყენებულ იქნას მრავალი მოლეკულური ბიოლოგიის აპლიკაციებში, როგორიცაა კლონირება ან ზონდის ბოლოების მარკირება დნმ-ის ან რნმ-ის ფოსფორილირებული ბოლოების მოსაშორებლად.კლონირების ექსპერიმენტებში, დეფოსფორილირება ხელს უშლის ხაზოვანი პლაზმიდური დნმ-ის თვითლიგირებას.მას ასევე შეუძლია დაშალოს არაინკორპორირებული dNTP-ები PCR რეაქციებში, რათა მოამზადოს შაბლონი დნმ-ის თანმიმდევრობისთვის.ფერმენტი მთლიანად და შეუქცევად ინაქტივირდება 70°C-ზე 5 წუთის განმავლობაში გაცხელებით, რითაც ფოსფატაზას მოცილება ლიგირებამდე ან ეტიკეტირების ბოლო არ არის საჭირო.
გამოყენება
1. ტუტე ფოსფატაზას დაწყვილებულ ცილებთან (ანტისხეულები, სტრეპტავიდინი და ა.შ.) შეუძლია კონკრეტულად ამოიცნოს სამიზნე მოლეკულები და შეიძლება გამოყენებულ იქნას ELISA, WB და ჰისტოქიმიური გამოვლენისთვის;
2. ტუტე ფოსფატაზა შეიძლება გამოყენებულ იქნას დნმ-ის ან რნმ-ის 5'-ტერმინალის დეფოსფორიზაციისთვის თვითდაკავშირების თავიდან ასაცილებლად;
3. ზემოაღნიშნული დეფოსფორილირებული დნმ ან რნმ შეიძლება იყოს ეტიკეტირებული რადიო მარკირებული ფოსფატებით (T4 პოლი-ნუკლეოტიდური კინაზას მეშვეობით)
ქიმიური სტრუქტურა
სპეციფიკაცია
სატესტო ნივთები | სპეციფიკაციები |
ფერმენტის აქტივობა | 5 U/μL |
ენდონუკლეაზის აქტივობა | Არ გამოვლინდა |
ეგზონუკლეაზას აქტივობა | Არ გამოვლინდა |
ნიკინგის აქტივობა | Არ გამოვლინდა |
RNase აქტივობა | Არ გამოვლინდა |
E.coli დნმ | ≤1ასლი/5U |
ენდოტოქსინი | LAL-ტესტი, ≤10EU/მგ |
სიწმინდე | ≥95% |
ტრანსპორტირება და შენახვა
ტრანსპორტირება:ამბიენტი
შენახვა:ინახება 2-8°C ტემპერატურაზე
რეკომენდირებულია ხელახალი ტესტიცხოვრება:2 წელი